雅培 4代p24抗原及抗体检测试剂

说明书

人类免疫缺陷病毒 p24 抗原及抗体检测试剂盒（胶体硒法）
说明书

【产品名称】

通用名称： 人类免疫缺陷病毒 p24 抗原及抗体检测试剂盒（胶体硒法）
英文名称： Alere HIV Combo

【包装规格】

20 个测试/包装袋、 100 个测试/包装袋。

【预期用途】

本产品用于体外定性检测人毛细血管全血、 静脉全血、 血浆或血清中的人类免疫缺陷病毒 1 型（HIV-1） 抗体、 2 型（HIV-2） 抗体和非免疫复合物（游离）HIV-1 p24 抗原。
本产品用于疑似感染 HIV-1/HIV-2 人群的辅助诊断。 抗体条带或抗原条带出现反应或二者均出现反应，都表明了 HIV 感染。本产品仅供专业人员使用。
AIDS（获得性免疫缺陷综合征）以 T 淋巴细胞个数的变化为特征。在感染个体中，病毒导致 CD4 淋巴细胞的消除，致使个体感染和罹患恶性肿瘤的机会增大。导致 AIDS 的病毒分为 HIV-1 和 HIV-2 两种类型。 HIV 病毒的复制导致细胞破裂并释放大量的 HIV 病毒颗粒。它们先是以 HIV RNA 的形式被检测到，其
次以抗原的形式 1,2。接下来，特异性的 HIV-1 和 HIV-2 抗体产生 3,4,5。 此时 HIV抗原可能因为组成抗原抗体复合物无法检测到。

【检验原理】

本产品利用免疫层析法原理定性测定血样中游离 HIV-1 p24 抗原以及 HIV-1和 HIV-2 抗体。
将样本加到样本垫上。样本与生物素化抗 p24 抗体，包被重组 HIV-1、 HIV-2及 HIV-1 O 型抗原的硒胶体结合物， HIV-2 合成肽以及抗 p24 小鼠单克隆抗体混合。该混合物继续通过固相迁移至抗体（Ab）窗口处的固定化重组 HIV-1/HIV-1O 型抗原和 HIV-1/HIV-2 合成肽，以及抗原（Ag）窗口处的固定化抗生物素蛋白。
如果样本中存在 HIV-1 和/或 HIV-2 抗体，则抗体与包被重组 HIV-1、 HIV-2及 HIV-1 O 型抗原的硒胶体结合物以及 HIV-2 合成肽结合，并与固定化重组HIV-1/HIV-1 O 型抗原及 HIV-1/HIV-2 合成肽结合，在抗体窗口位置形成一条红线。如果不存在 HIV-1 和 HIV-2 抗体，则硒胶体结合物流过抗体窗口，不会在抗体窗口位置形成红线。
如果样本中存在游离非免疫复合 HIV-1 p24 抗原，则抗原与生物素化抗 p24抗体和包被抗 p24 小鼠单克隆抗体的硒胶体结合物结合，并与固定化抗生物素蛋白结合，在抗原窗口位置形成一条红线。如果不存在 HIV-1 p24 抗原，生物素化抗 p24 抗体和硒胶体结合物均流过抗原窗口，不会在抗原窗口位置形成红线。
为了确保结果有效，在反应条中含有质控条带。

【主要组成成分】

检测卡： 包被 HIV-1/2 重组抗原、合成肽、抗 p24 抗体及抗生物素蛋白。

配件（需要但未提供）

用于全血检测： 缓冲液。
用于指尖血检测： EDTA 毛细管、 酒精棉球、纱布垫、采血针。
此外，还需要： 50μL 精细分液器（指尖血除外）、一次性手套、计时器。

【储存条件及有效期】

2~30℃保存，有效期为 18 个月。
生产日期及失效日期见包装标签。
• 按照规定处理和储存时，试剂盒组分在有效期内稳定。不得使用超过有效期
的试剂盒组分。
• 未使用的检测卡应立即用含有干燥剂的铝箔袋重新密封，从一端向另一端按
压密封条闭合铝箔袋。
• 不得使用潮湿或包装破损的检测卡

【样本要求】
样本采集
静脉穿刺采集血清、血浆和全血

• 应该以无菌的方式通过静脉穿刺采集人体血清、血浆和全血，避免溶血。
• 尽快从血凝块中分离出血清，或者从浓集细胞中分离出血浆，避免溶血。

采集指尖全血 6（见图 1）

使用 EDTA 毛细管。

警示： 玻璃 EDTA 毛细管在运输或者使用的过程中可能破损。 在去除包装、使用和丢弃的过程中要小心处理，以避免受伤。
采集指尖全血样本之前，将 EDTA 毛细管放置在洁净干燥的表面上。
1. 选择中指、无名指或食指的指尖（选择结茧最少的手指）。
根据需要使用温热的湿毛巾或者温水增加血流量。
2. 用酒精清洁指尖；自然晾干。
3. 掌心向上。将采血针放置在指尖偏离中心的位置。对着手指
使劲按下采血针，刺穿皮肤。在合适的生物危害利器盒中处置
采血针。
4. 使用无菌纱布垫拭去第一滴血。

图一

5. 使手指低于肘部，并轻轻地间歇性地按压针刺手指的根部数
次。使 EDTA 毛细管尖端接触血滴。避免气泡的产生。使血液
充满毛细管至 2 条标线之间（50 μL）。

样本的贮存

• 如果采集后 7 天内进行检测，则血清和血浆样本应该贮存于 2~8℃。如果检
测延迟超过 7 天时间，样本应该-20℃或更低温度冷冻保存。
• 避免反复冻融。
• 样本出现颗粒物或浑浊，应在检测前离心，避免提供错误的结果。样本必须
在室温下 10000 g 离心 5 分钟。从上清液中小心地移取 50 μL 试样。如果液
体表面形成了脂质层，确保从脂质层下的澄清液体中移取试样。
• 如果采集后 7 天内进行检测，则通过静脉穿刺采集的全血样本应该贮存于
2~8℃。 禁止冷冻全血样本。 检测前轻轻颠倒试管混匀样本。
• 通过指尖采集的全血应该立即进行检测。
【检验方法】

弯折并撕开穿孔位置，从10次装检测卡上取用所需数量的卡片。

注意：
•应该从检测卡右侧取用检测条，保留检测卡的批号。单独的检测条上未打印批号和失效期。
•取下检测条的保护性铝箔薄膜后应立即进行检测。
•如果读取结果时检测条变干，难以看清条带，应该重复检测。
•如果血清或血浆样本没有流动，或呈现异常流动，例如停在窗口中部，应该离心样本，采用新的检测条重新检测。

警示：当毛细管未垂直样本垫放置时，全血（指尖血）样本可能会出现异常流动。如出现此种情况，应重新采集新的样本并且采用新的检测条检测。
1.取下各检测条的保护性铝箔薄膜。
2.血清或血浆样本：
a.（用精细分液器）加50 μL样本到样本垫上（用箭头符号标记）。
b.加入样本后，至少等20分钟（最多等40分钟），读取结果。
3.全血样本（静脉穿刺采血）：
a.（用精细分液器）加50 μL样本到样本垫上（用箭头符号标记）。
b.等1分钟允许样本被吸收，在样本垫上加1滴缓冲液，保持瓶子垂直。
c.加入样本后，至少等20分钟（最多等40分钟），读取结果。
4.使用EDTA毛细管的全血样本（指尖采血法）：
a.将含有血液样本的毛细管垂直放置在样本垫中央（用箭头符号标记）。

b.当所有血液从毛细管转移至样本垫上之后，立即加1滴缓冲液到样本垫上，保持瓶子垂直。

警示：所有血液转移至样本垫上之前，禁止从样本垫上提起毛细管——否则可能产生气泡，本将不能完全转移，从而使检测无效。可能需要超过1分钟时间才能完全转移样本。
c.加入样本后，至少等20分钟（最多等40分钟），读取结果。

质量控制
为了确保检测的有效性，装置中包括方法质控条带，标记为“C”。质控窗口的任何可见条带（即使非常微弱），均应解释为有效结果。如果在检测结束前未出现质控条带，则检测无效，需采用新的检测条重新检测该样本。

【检验结果的解释】

注意：
•即使患者条带比质控条带颜色更浅或更深，检测结果仍为阳性。
•抗体条带或者抗原条带的颜色不管是深于还是浅于质控线都表明结果有效。任何可见条带（即使非常微弱），均应解释为有效结果。
•如果背景特别深，则考虑该检测结果无效。
•如果反复出现无效结果，或者为了获取技术援助，请联系您当地的经销商或者拨打技术支持电话。

抗体阳性（2个条带——质控和抗体条带）
检测条的质控窗口（标记为“C”）和抗体窗口（标记为“AB”）均出现红线。抗体窗口出现的任何可见红线均应解释为阳性。
抗原（p24）阳性（2个条带——质控和抗原条带）
检测条的质控窗口（标记为“C”）和抗原窗口（标记为“AG”）均出现红线。抗原窗口出现的任何可见红线均应解释为阳性。只存在一个抗原反应表明感染处于早期阶段。可以建议进行跟进检测，以便跟踪将来预期的抗体检测。
抗体阳性和抗原（p24）阳性（3个条带——质控、抗体和抗原条带）
检测条的质控窗口（标记为“C”）、抗体窗口（标记为“AB”）和抗原窗口（标记为“AG”）均出现红线。抗体窗口和抗原窗口出现的任何可见红线均应解释为阳性。
阴性（1个条带——质控条带）
检测条的质控窗口（标记为“C”）出现红线，而检测条的抗体窗口和抗原窗口（标记为“AB”和“AG”）均未出现红线。

无效（没有质控条带）
如果检测条的质控窗口没有出现红线，即使检测条的抗体或抗原窗口出现红线，结果仍然无效，并应重复检测。

【检验方法的局限性】

•本产品同时检测人体血清、血浆和全血中HIV-1和/或HIV-2抗体以及游离非免疫复合HIV-1 p24抗原。不应使用其它体液或合并样本，否则可能无法产生准确的结果。
•抗体和抗原条带颜色的深浅与样本中抗体和抗原的滴度无关。
•HIV抗体阳性和HIV-1 p24抗原阴性的结果不能排除急性感染的可能性。

•做出诊断之前，应该使用另外一种方法确认阳性结果，并根据整体临床评价评估结果。
•检测无法绝对保证样本不含低水平HIV-1 p24抗原和/或HIV-1及HIV-2抗体，例如在感染的极早期阶段出现的抗原和/或抗体。
•HIV抗体和HIV-1 p24抗原的阴性结果不能排除暴露或感染HIV-1或HIV-2病毒的可能性。
•当p24抗原与抗体结合后，抗原条带可能出现阴性结果。因抗体趋向于与抗原结合形成免疫复合物，高水平的抗体通过血清转化抑制抗原。本产品仅检测非免疫复合物（游离）抗原，无法检测免疫复合物（结合）抗原。
•经证明，一些服用抗逆转录病毒药物的已知HIV感染患者，使用快速试剂盒进行检测时出现了假阴性的结果10,11,12。
•如果临床表现或其它资料表明结果不一致，则患者应该立即使用核酸检测技术检测，和/或在初次检测21天后，重新检测HIV抗体。
•含有除了EDTA以外的其它抗凝剂的全血或血浆样本尚未通过用于本产品进行验证，可能产生不正确的结果。
•感染HIV的妇女所产婴儿在18个月大之前可能携带母体抗体，抗体检测为阳性并不一定表示新生儿真实的感染状态。CDC不推荐使用HIV-1 p24抗原检测排除新生儿感染（直到18个月大），因为其灵敏度不佳，特别是在HIV抗体存在的情况下。幼儿早期HIV感染的确诊需要进行其它检测，包括HIV核酸检测或病毒培养9。

【产品性能指标】

灵敏度
通过检测确定的HIV抗体阳性样本、市售血清转换盘及HIV-1亚型病毒盘评估灵敏度。
1.HIV抗体阳性样本

表I—HIV抗体阳性样本

*亚型：A、C、D、F、G、H、J、K以及CRF01-AE、CRF02-AG、CRF03-AB、CRF05-DF、CRF09-A/U、CRF11-cpx

**在欧洲收集的样本

总共检测了682个确定的HIV阳性样本（表I）。本产品对这一样本总体的抗体诊断灵敏度经计算为100%。

2.HIV血清转换盘

表II—HIV血清转换盘

*供应商提供的数据

**PRB949第五号未检测到

NT：未检测到
使用31套血清转换盘评估本产品的灵敏度，每套均包含早期血清转换盘（总共98份早期样本）。将所得结果与市售CE认证HIV第3代快速检测试剂盒（免疫层析法）、CE认证HIV第4代快速检测试剂盒（免疫层析法）、CE认证HIV第4代检测试剂盒（微粒子化学发光免疫分析法）和抗原检测试剂盒（酶免疫分析法）的结果进行比较。31个血清盘中的28个，比市售CE认证HIV第3代免疫层析法快速测试试剂盒更早地检测到HIV感染。31个血清盘中的11个，比CE认证HIV第4代快速检测试剂盒（免疫层析法）更早地检测到HIV感染。20个血清盘中有6个比CE认证HIV第4代检测试剂盒（微粒子化学发光免疫分析法）晚一个采血日检测到HIV感染。31个血清盘中有8个比抗原检测试剂盒（酶免疫分析法）晚一个采血日检测到HIV感染。

3.HIV-1 p24抗原亚型
使用人体HIV阴性血清稀释50份分别培养的HIV分离株制备了50个HIV病毒盘；分离株包括HIV-1 M型的亚型：A（4）、B（8）、C（7）、D（5）、F（5）、G（2）、H（1）以及CRF01-AE（10）、CRF02-AG（2）、HIV-1 O（4）及HIV-2（2）。本产品可以检测所有HIV-1病毒盘，但不能检测HIV-2病毒盘。
4.HIV-1 p24抗原的分析灵敏度
通过测试WHO国际标准品HIV-1 p24抗原（NIBSC代码90/636）评估本产品的分析灵敏度。结果表明该测试可以检测浓度为2 IU/mL的HIV-1 p24抗原。

特异性
使用本产品总共测试了2469份确认的阴性血清或血浆样本，测定了抗体条带和抗原条带的特异性（表Ⅲ）。抗体条带的特异性为99.96%，抗原条带的特异性为99.76%。

表Ⅲ特异性

*包括在欧洲（300）、美国（1299）和非洲（150）采集的样本
**类风湿因子、抗核抗体、系统性红斑狼疮、高胆固醇、高总蛋白、高IgM、人抗鼠IgG、其它传染病（乙肝病毒、丙肝病毒、人体T细胞白血病病毒I型或II型、巨细胞病毒、弓形虫IgG、梅毒、单纯疱疹病毒1/2以及EB病毒）、流感疫苗接种患者以及透析患者的样本。

样本类型

表Ⅳ-配对全血（静脉穿刺和指尖采血）、血清及血浆样本的抗体灵敏度

NT：未检测到

多组（配对）样本：

使用本产品测试了50例非洲个体的血清阳性样本（表Ⅳ）。从来自非洲的供体采集多组（配对）样本，50份血清样本、50份血浆样本、50份（静脉穿刺）全血样本以及50份（指尖采血）全血样本。所有样本基质中产生的结果显示出100%的相关性，表明本产品对这些样本基质类型产生了相同的结果。

表Ⅴ-配对全血（静脉穿刺和指尖采血）、血清及血浆样本的特异性

NT：未检测到

多组（配对）样本：

使用本产品测试了50例非洲个体的血清阴性样本（表V）。从来自非洲的供体采集多组（配对）样本，50份血清样本、50份血浆样本、50份（静脉穿刺）全血样本以及50份（指尖采血）全血样本。所有样本基质中产生的结果显示出100%的相关性，表明本产品对这些样本基质类型产生了相同的结果。

国内临床共完成血清样本1104例。本产品对HIV抗体检测结果的总符合率为100.0%，对HIV抗原检测结果的总符合率为99.91%。

【注意事项】

•用于体外诊断。

•仅供专业人员使用。

•专业用户可以根据需要获取安全数据表。

警告：对于含有感染源和怀疑含有感染源的物质应有合适的生物安全保证程序7,8，下列为有关注意事项，但不仅限于此：

a.带手套处理样品和试剂。

b.禁止用嘴吸样。

c.不可在处理这些物品时吸烟、进食、喝饮料、美容和处理隐形眼镜。

d.用消毒剂对溅出的样品或试剂进行消毒，比如用0.5%的次氯酸钠和其它有效消毒剂7,8。

e.按当地的有关条例来消毒和处理所有标本、试剂和潜在的污染物7,8。

【参考文献】
1、Pilcher C, Eron JJ, Galvin S, et al. (2004)Acute HIV revisited: new opportunitiesfor treatment and prevention. The Journal of Clinical Investigations 113(7):937-945.

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11、O’Connell RJ, Merritt TM, Malia JA, et al. Performance of the OraQuick RapidAntibody Test for Diagnosis of Human Immunodeficiency Virus Type 1 Infection in Patients withVarious Levels of Exposure to Highly Active AntiretroviralTherapy. Journal of Clinical Microbiology. 2003; 41(5):2153-2155.

12、
O’Connell RJ, Agan BK, Anderson SA, et al. Sensitivity of the MultispotHIV-1/HIV-2 Rapid Test Using Samples from Human Immunodeficiency VirusType 1-PositiveIndividuals with Various Levels of Exposure to Highly ActiveAntiretroviral Therapy. Journal of Clinical Microbiology. 2006; 44(5):1831-1833.

【基本信息】
注册人/生产企业名称：美艾利尔（日本）医疗有限公司Alere Medical Co., Ltd.
住所：357 Matsuhidai, Matsudo-shi, Chiba-ken,270-2214,Japan
生产地址：357 Matsuhidai, Matsudo-shi, Chiba-ken,270-2214,Japan
电话：+81 47 311 5750传真：+81 47 311 5751
售后服务单位名称：美艾利尔（上海）医疗器械销售有限公司客户服务热线：400 889 1117
代理人名称：美艾利尔（中国）医疗器械有限公司
住所：中国（上海）自由贸易试验区金科路3728号4号楼221室邮编：201203电话：021-51315388传真：021-33830280
【医疗器械注册证编号/产品技术要求编号】
国械注进20183400417
【说明书核准日期及修改日期】
核准日期：2018年10月26日修改日期：2018年11月01日